Banco de Proyectos UNM
Código - Título:
PI-CAYT-01-2020
Nombre del Proyecto:
Desarrollo de una metodología novedosa para la selección de aptámeros. Aplicación al diagnóstico de Arbovirus (PI)
Resumen:
Los aptámeros son moléculas cortas de ácidos nucleicos de cadena simple (ADN o ARN), naturales o modificados sintéticamente que pueden desarrollarse de tal modo de poseer alta afinidad y especificidad para interactuar eventualmente con cualquier especie química. Esto quiere decir que poseen la propiedad de reconocimiento y unión a objetivos moleculares de cualquier índole. Esta propiedad los hace útiles tanto en la investigación básica como en aplicaciones tecnológicas, entre las que pueden mencionarse, en forma no exclusiva, la detección de toxinas, microorganismos, tipos celulares y sus unidades constitutivas (proteínas, antígenos varios, organelas). Como consecuencia, algunos aptámeros desempeñan papeles prometedores en el terreno analítico, incluido el diagnóstico clínico, y terapéutico. Pueden considerarse como análogos de los anticuerpos monoclonales, pero cuentan con varias ventajas sobre éstos, entre las que cabe destacar la facilidad de su obtención y su estabilidad, que permite conservarlos durante meses o años sin cadena de frío. Esta última característica los hace muy ventajosos como reactivos de diagnóstico en aplicaciones POC (point of care) en situaciones en que ni la cadena de frío ni la accesibilidad a un laboratorio de elevada complejidad sean esperables (como salas de primeros auxilios en localidades remotas o de escasa infraestructura). La metodología tradicional de selección de aptámeros se basa en la evolución in vitro de colecciones de candidatos putativos de estructura desconocida para la especie química objetivo (SELEX, por systematic evolution of ligands by exponential enrichment). En forma resumida, la colección de candidatos se pone en contacto con la sustancia objetivo y aquellos componentes que presenten afinidad se separan de aquellos que no posean dicha característica, obteniéndose una primera sub-colección. La amplificación por técnicas de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) de la sub-colección permite realizar una segunda ronda de selección. El proceso se repite de tal manera de imponer condiciones más exigentes en cada ronda consecutiva de selección, permitiendo la amplificación exclusiva de aquellas sub-colecciones que cumplan con dichas condiciones. Cuando la sub-colección resultante posee las características deseadas, su estructura química es elucidada y posteriormente sintetizada. Una limitación a su empleo, ya sea in vivo o en fluidos biológicos, es que son susceptibles a la degradación por componentes de los mismos (nucleasas). Esta limitación puede ser superada empleando ácidos nucleicos modificados, pero para ello es necesario contar con sistemas de amplificación y elucidación independientes de la maquinaria enzimática empleada en la PCR y del empleo de microorganismos. El objetivo del presente proyecto de investigación es avanzar en una metodología alternativa de desarrollo de aptámeros que evite los problemas técnicos asociados a la metodología clásica y que permita un crecimiento en la capacidad de obtener estas moléculas de una forma más rápida y eficiente, y ampliando su ámbito de aplicación. En este sentido se trata de un proyecto de investigación básica con aplicaciones directas en el ámbito de la biotecnología, como pueden ser la identificación de blancos moleculares, su detección, cuantificación y purificación.
Unidad:
Departamento de Ciencias Aplicadas y Tecnología. Programa para la Investigación e Innovación en Biotecnología
Línea Prioritaria:
INVESTIGACIÓN E INNOVACIÓN EN BIOTECNOLOGÍA
Sublínea Prioritaria:
Diagnóstico molecular
Fuente de Financiamiento:
Fecha de Inicio:
01/10/2020
Fecha de Finalización:
15/06/2021
Etapa:
Finalizado
Director/a - Inv. Responsable:
Bisceglia, Juan Angel (DCAYT) - Iribarren, Adolfo Marcelo (Externo: UNQui)
Codirección:
Integrantes:
Ceniquel, Marcos Guillermo (DCAYT) - Robles, Aylén Magalí. Auxiliar estudiante (LBT)
Palabras Clave:
Aptámeros, Reconocimiento molecular, Selección in vitro
Aprobación:
UNM-DCAyT N° 07/20 - Prórroga:
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