Banco de Proyectos UNM

Resumen: El tratamiento específico de referencia para muchas patologías como las intoxicaciones, los envenenamientos por accidentes con animales ponzoñosos y las enfermedades virales, son medicamentos terapéuticos basados en anticuerpos policlonales provenientes de equinos hiperinmunizados. Los principios de esta metodología fueron establecidos hace más de 100 años y no ha sufrido grandes cambios hasta la fecha. En Argentina, el proceso productivo del INPB-ANLIS Malbrán se basa en el tratamiento con pepsina del plasma equino hiperinmune seguido de una doble precipitación con sulfato de amonio y un paso de ultrafiltración. Este bioproceso, si bien provee un antiveneno de buena calidad, es trabajoso y su rendimiento es bajo (menos del 30%). La acidez necesaria (pH 3.2) para la digestión enzimática y la precipitación con sulfato de amonio afectan al rendimiento ya que inducen la desnaturalización de proteínas y la formación de agregados. Este proyecto propone combinar una etapa inicial de purificación de las IgGs del plasma hiperinmune seguida de una digestión enzimática de estas empleando una enzima recombinante alternativa, la IdeE2. Esta última ha sido descripta en Streptococcus equi spp. equi y actúa como endopeptidasa específica de las IgGs equinas en condiciones de pH neutro, liberando fragmentos semejantes con Fab’2. En primer lugar, se la clonará, expresará y purificará para luego optimizar las condiciones de tratamiento de plasmas hiperinmunes equinos y de IgGs purificadas a partir de estos. Se espera de esta manera sentar las bases para la evaluación futura de estrategias de incorporación de esta enzima en el proceso de producción de medicamentos inmunoterapéuticos. Esta estrategia colaboraría a elevar significativamente el rendimiento del proceso productivo actual, y permitiría no solamente garantizar la disponibilidad estos medicamentos a nivel local, sino también, abastecer a la demanda insatisfecha de varios países de la región.